微量分光光度计选购指南

2012-06-13 点击量：

自从03年Nanodrop推出超微量分光光度计，立即受到全球各分子生物学实验室的一致追捧和好评。仅需0.5-1ul的样品体积，对于分子生物学实验来说，不仅意味着大大减少检测损耗的样品，也因为检测光径减小而减少了对高浓度样品如核酸或蛋白进行梯度稀释的需求，实在太方便。

近期的超微量分光光度计市场可真是热闹，各大品牌如NanoDrop、BioTek、岛津等，都争相推出了新力作。让人欣喜的是，我们还看到了可与大品牌媲美的国产分光光度计，这说明国内的仪器市场也在不断地创新。因此，如何选择一台合适的微量分光光度计显的尤为重要。

分光光度计作为实验室中常用的仪器之一，从低端到高端，五花八门，大家在选择时可能有些无所适从。而只有从实验室的实际需要出发，才能挑选出合适的仪器。

①你们实验室的常规应用有哪些？未来会增加或改变吗？

②你需要测量的样品体积范围？如果它变化很大，你需要着重考虑分光光度计的样品量和灵活性。

③你是否需要同时测量多个样品？

④你需要什么样的灵敏度？对于低浓度样品，3-5 nm的带宽比窄带宽（1 nm）仪器的一致性更好。

⑤有多少人会共用这一台分光光度计？如果多人共用，预设程序可能会比较方便。

有一些硬性指标，在选购时不得不看。分光光度计的波长范围是选购时要考虑的重要因素之一。在生物学实验中，一台覆盖紫外光和可见光的分光光度计是不可缺少的。

分光光度计的带宽（bandwidth）很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。对于定量分析而言，3-5nm比较合适。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要，当然，价格也更高。

在检测器方面，CCD阵列更为普及。它具有非常高的量子效率、噪声比光电二极管阵列低100倍，不仅光利用率得到改善，信噪比也得以提高。另外，CCD 阵列系统采用模块化处理，使仪器在稳定性方面更优于如光电倍增管（PMTs）等单点真空管检测器。

样品量也是重要的考量因素。以前的比色皿，动辄50 ul，对于珍贵样品来说那可真是大出血。因此现在面向分子生物学的分光光度计都趋向于微量化了（挥发性样品不宜）。近期推出的几款分光光度计，都无需比色皿，将样品滴在特殊的表面上即可测量，所需的样品量在2 ul或以下。这种方法检测范围超宽，无需对样品进行稀释。稀释样品不仅耽误时间，在准确性上也是大打折扣。

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