细胞转染类产品及其分代

自营品牌馆

2012-06-13点击量:

         代:磷酸钙转染和电转染。磷酸钙转染仅对极少量细胞能达到较高的转染率,对绝大部分细胞的转染率低于10%。而电转染,往往只能用于细胞系,每一次电转染,都会严重影响转染细胞的状态,同时会导致大量细胞死亡。因此,这两种方法应用越来越少。

    第二代:脂质体和腺病毒为核心产品。通过脂质体携带质粒进入细胞,解决了很多细胞系转染的难题,尤其是在细胞处于分裂是旺盛阶段进行转染,质粒更容易表达。代表产品如lipofectin 2000等。但是对于不再分裂,或处于细胞周期后阶段的细胞,或许多原代培养细胞,或难以转染的某些细胞系,如神经细胞,内皮细胞,心肌细胞等等,脂质体不能达到有效的转染效率。

    腺病毒转染系统。病毒由天然感染细胞能力,腺病毒对心肌细胞等有较高的感染效果。然而腺病毒转染系统有几大缺陷,一是不能形成稳定转染,其转染均为瞬时转染;二是对有些细胞转染效率较低,应用范围较窄;三是操作流程复杂。因此,近年来又开发出AAV病毒转染系统,克服了不能形成稳定转染的弱点。但是腺病毒操作复杂,应用范围受限,因此,未能得到大规模应用。

    第三代:慢病毒载体系统。国外在上个世纪末,研究出全新的载体系统,一方面要求对各类哺乳动物细胞均具有高效的感染能力;二是需要形成稳定转染;三是与目前的RNAi系统能进行结合。慢病毒载体系统应用而生,它的诞生,迎来了细胞转染类产品的重要变革,迅速在国际上得到广泛应用。目前Pubmed中收录有关lentivirus载体用作实验的文章超过6万篇,仅Nature,Science,Cell上便超过500篇。已成为国际上通用的转染系统,广泛用于各类实验室。

国内在2003年由中国科学院上海生化细胞所率先试用,逐步有实验室开始应用此类产品,但由于对慢病毒不熟悉,而且由于国内没有同类产品,国外产品价格偏高,因此未得到大面积普及,这一点明显落后于欧美国家水平。

相关文章:细胞转染的步骤质粒转染细胞方法

欢迎致电:021-51083677

 

上一篇: 生物芯片的技术原理

下一篇: 实时荧光定量PCR