1. 引物好在模板cDNA的保守区内设计。
2. 引物长度一般在15~30碱基之间。
3. 引物GC含量在40%~60%之间，Tm值好接近72℃。
4. 引物3′端要避开密码子的第3位。
5.引物3′端不能选择A，好选择T。
6. 碱基要随机分布。
7. 引物自身及引物之间不应存在互补序列。
8. 引物5′ 端和中间△G值应该相对较高，而3′ 端△G值较低。
9. 引物的5′端可以修饰，而3′端不可修饰。
10. 扩增产物的单链不能形成二级结构。
11. 引物应具有特异性。
引物 设计原则
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