目前市面上有多种的逆转录酶，是不是让你感觉到眼花缭乱，无所适从呢？不过只要抓住了以下几个关键因素，问题就会迎刃而解了。
1．RNase H活性和产物长度。逆转录酶自带RNase H活性，RNase H在逆转录实验过程中会降解RNA模板，进而影响逆转录产物的长度和产量。因此在全文库构建、需要克隆较长片段或者未知长度的DNA时，要得到完整的逆转录的产物长度，好选择无RNase H活性的逆转录酶，或者RNase H活性低的混合酶产品，医流商城提供的多个品牌的逆转录酶的转录产物可长达12kb以上，甚至高达20kb。AMV逆转录酶和MMLV逆转录酶都有RNase H的活性，MMLV逆转录酶的RNase H活性比AMV弱。医流商城还提供基因工程突变的MMLV逆转录酶，去除了RNase H活性，有利于获得更多全长的cDNA，而对于已知较短片段，逆转录活性高、适应性强的AMV逆转录酶是不错的选择。
2．适温度。一般的逆转录酶在遇到mRNA复杂二级结构时往往会脱离模板，导致逆转录无法有效继续，得不到长的反应产物。提高反应温度有助于消除模板的二级结构，增加逆转录的特异性，减少错配。但是较高的反应温度可能导致酶工作效率的降低。AMV逆转录酶由于来源于禽类病毒，适温度42℃，耐受温度范围较宽，逆转录活性强。MMLV逆转录酶适温度37℃，经过基因工程的改造的热稳定MMLV逆转录酶可在较短时间（1-3.5hours）耐受50-60℃反应温度，不过反应温度越高耐受期也越短。来源于高温环境下的嗜热细菌的逆转录酶是耐热性高的酶，可长时间耐受高达70℃度的反应温度，即使困难的模板也可以迎刃而解。因此，如果你的模板GC含量高或者具有复杂的二级结构，可根据情况选择热稳定的逆转录在更高的温度（55-70℃）下反应能得到较好的结果。
3．灵敏性。如果你的模板量很少，如来自珍稀物种等极为珍贵的样品，或者是显微镜下才可见的微小寄生生物，那么就要选择灵敏度高的逆转录酶。逆转录酶不断在升级换代，检测起始模板的总RNA量的下限已低至pg级别，对高丰度管家基因甚至低到0.1pg起始总RNA即可检测到。对于样品量大的常规检测或者扩增，不必考虑灵敏性时，不妨选择逆转录酶活性高适应性强的逆转录酶。
4．保真度。逆转录酶通常不具有3′→5′外切酶活性，因此没有校正功能，由逆转录酶催化合成的DNA错配率比较高，这可能也是病毒变异性高适应性强的原因之一。现在已经有校对功能的高保真逆转录酶推出，所以如果你想接着做表达和测序，高保真的逆转录酶就是你的佳选择了。
5．反应效率。一般来说，粗放、耐受性强的酶效率高，产量大，对于反应条件要求不高，很适合常规检测或者模板量大，长度较短的普通逆转录实验。而高保真、高灵敏度或者高温反应可能会影响反应效率。不过现在流行组合酶，将几种不同的逆转录酶混合以达到兼顾的效果。短的反应时间已经从常规的1小时左右缩短到10分钟。这对于科研不断提速，追求更快出结果的实验人员来讲是一个很好的消息。
6．价格比。产品价格是大家关心的问题之一。对于逆转录酶，需要留意不同品牌的酶的单位定义，有的产品每次反应需要200U的酶，有的则为几个单位，“单位”内涵不同。评估每次反应的成本，需要以一个包装能做的反应次数为准来判断。另外，有些性能出众的好产品价格不菲，所以不妨留意促销活动，趁价格非常划算之际，抓紧时间购买。
