检测糖化血红蛋白的操作方法

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2015-04-08点击量:

 

糖化血红蛋白是人体血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物。
检测糖化血红蛋白的操作方案:
1、操作方法 (1)收集静脉血、加入EDTA抗凝。(2)根据样品数取试管若干,分别吸取400μl溶血剂加入各试管中。(3)分别吸取80μl标准或样本放入上述各试管中,混合均匀。(4)放置5~10min,则制成了血红蛋白样本A3。
2、糖化血红蛋白的制备及测定(1)根据样品的数量,取干净的试管若干,分别吸取3.0ml阳离子树脂,放入各管中。(2)向上述试管中分别加入已预备的 100μl血红蛋白样本(A3)。将层析柱插入试管中, 使得橡皮塞高于液面至少1cm。(3)充分摇荡试管混合5~10min(好使用涡旋摇荡器,如果没有则需剧烈摇荡20min。(4)然后慢慢推动层析柱 进入试管,直到糖化血红蛋白提取完全。(5)上清液倒入另一支试管或直接倒入比色杯进行比色。(6)以蒸馏水作空白在415nm调零。(7)读取并记录标 准,样品吸光度值。
3、总血红蛋白测定(1)根据样品数量取试管若干,分别加入5.0ml蒸馏水。(2)加入20μl血红蛋白样本(A3)。混合均匀。(3)以蒸馏水作空白在415nm调零。(4)读取并记录各管吸光度值。
计算:糖化血红蛋白吸光度 总血红蛋白吸光度×10=糖化血红蛋白%(正常值范围6.0%~8%)。
 

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