TPS溶液的配制:
Tris-Cl (pH 8.0)
EDTA (pH 8.0)
KC
(配制的容量,请咨询本公司的技术支持)
(以下内容只是简单介绍,详细情况,可咨询本公司技术支持)
1.取一片拟南芥的叶片(或10d左右的小苗),加入两毫升EP管中。
2.加钢珠1颗
3.加TPS提取液100ul
4.打碎。50MZ 1min。(水稻嫩叶为。45S,60HZ 老叶为,70S 60HZ)
5.稍离心(4000rpm),将打碎的组织和提取液一起转移至96孔板中。
6.96孔板加盖子,75°加热15min
7.大离心机高转速10min
8.取上清,转入另一块96孔板,加入等体积的异丙醇。
9.加盖子,混匀
10.4°10min或-20° 10min,如材料很多此步骤可省略。
11.高转速离心10min。
12.弃上清,加入200ul 70%乙醇。
13.高转速离心10min
14.弃去乙醇,37°放置20-30min烘干
15.加入80ul水,65°放置10min
16.离心除去气泡,之后可以直接用于PCR实验。
-20°下该方法的DNA可以保存4个月以上,4°大致可以放2-3周。