血清总蛋白测定原理的双缩脲法

ada

2012-06-06点击量:

 

血清总蛋白测定原理双缩脲法

    双缩脲反应:将两分子尿素分子加热脱去一分子氨而形成的就是双缩脲 NH2-CO-NH-CO-NH2

双缩脲在碱性溶液中与CU2+结合形成紫红色络合物,这样的呈色反应,称之为双缩脲反应

因为蛋白质含有大量彼此相连的肽键(-CO-NH-),也可以在碱性条件下与CU2+进行双缩脲反应

生成紫红色的络合物。且在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在10—120g/L这个范围内有良好的

线性关系。

基于此原理,将未知浓度的样品溶液与一系列已知浓度的标准蛋白质溶液同时与双缩脲试剂进行反应,并于540NM通过标准浓度蛋白质绘制的标准曲线,就可以求得样品蛋白质浓度.

紫红色络合物呈色反应

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