液相色谱柱的维护与保养

岛津品牌馆

2012-07-23点击量:

液相色谱柱的维护与保养

一般的情况下:为了方便工作色谱柱都保存在要分析用方法的流动相中,这个流动相是没有缓冲盐的。如果您的流动相中有缓冲盐,可以另外配置一份没有缓冲盐的流动相,专门用来冲洗色谱柱,如果您两三天不用,那么反相柱应该先用5%的甲醇95%水将色谱柱中德缓冲盐冲洗干净(至少要20倍柱体积)好不要用纯水,反相柱好保存在乙腈的条件下(甲醇也可以)正相柱好保存在正已烷和异丙醇中(95 :5)的条件下好每月冲洗一二次。
 
色谱柱当用到一定得时间后会出现柱效下降,可以做一次简单的再生。
建议用来冲洗的溶剂体积                 

柱尺寸
柱体积
溶剂体积
150*4.6
2.5ml
50ml
250*4.6
5.0ml
100ml
250*10
20ml
400ml

请根据下表选择您的再生方法
极性固定相(如Sil NH2 Diol 色谱填料的再生:
正庚烷-氯仿-乙酸乙酯-丙酮-水
非极性固定相(如反相填料C18 C8 C4 CN等)的再生:
-乙腈-氯仿或异丙醇-乙腈-水 0.05M稀释酸可以用来清洗已被污染的色谱柱
注:在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能成按根离子的形成存在,因此应该在水洗后用0.1M氨水冲洗然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。
注:如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶吸附的杂质,用0.05M硫酸的冲洗非常有效。
 
              HPLC 固定相及其应用范围 

名称
别名
正相 反相
离子交换
应用
Silica
Sio2
*
 
 
非极性和中等极性以及非离子型有机化合物
SAS
C1
 
*
 
在所有的烷基键合相中对非极性化合物保留弱通常用于中等极性和多官能团化合物
Butyl
C4
 
*
 
分离肽和蛋白质保留时间比C18 C8短
MOS
C8
 
*
 
中等极性到强极性化合物 小肽和蛋白质 极性药物巢族化合物和环境样品
ODS
C18
 
*
 
烷基键合相中对中等极性化合物保留强广泛用于药物脂肪酸和环境样品
CPS
CN
*
*
 
对极性化合物有独特的选择性适用于正相分离当用反相系统时其选择性与C18和C8不同在药学领域和复杂混合物的分离中得到广泛应用
APS
NH2
*
*
*
反相中分析糖类和其它极性化合物 弱阴离子交换阴离子和有机酸则应用缓冲剂和有机改性剂做流动相正相中与硅胶的选择性不同分析芳香族效果很好
Diol
 
*
*
 
反相时:分离肽和蛋白质
正相时:与硅胶选择性相同 但极性较弱
SCX
强阳离子
 
 
*
有机碱
SAX
强阴离子
 
 
*
有机酸 核苷与核苷酸
Phenyl
 
 
*
 
芳香族化合物

 
       

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