产品描述
包涵体是重组蛋白因为过度表达、蛋白无足够时间进行肽链折叠,部分折叠中间态之间的特异性错误聚合形成的一种不溶性结构。这些基因表达产物的氨基酸序列虽然正确,而其立体结构是错误的,因此一般没有生物活性。包涵体一般含有50%以上的重组蛋白,其余为外源蛋白、核糖体元件、RNA 聚合酶、内毒素、外膜蛋白ompC、ompF 和ompA 等、核酸(环状或缺口的质粒DNA),以及脂体、脂多糖等,无定形,呈非水溶性,只溶于变性剂如尿素、盐酸胍等。使用本产品提取包涵体蛋白,可增加包涵体蛋白的溶解性,提高包涵体蛋白的提取效率,变性剂可通过透析去除。
通过大肠杆菌表达的重组蛋白70%-80%都以包涵体的形式存在,一旦形成聚集,就很难被溶解。包涵体内的蛋白折叠异常,但是表达蛋白丰富,容易分离纯化,不易被内源性蛋白酶水解。通过特殊化学处理,包括变性剂、还原剂、鳌和剂等,能使不溶性状态恢复为可溶性状态。本试剂可溶解抽提后得到的包涵体,使其成为可溶性蛋白,并可根据实验具体需要添加还原剂或者螯合剂,通过BCA法可检测蛋白浓度。
保存:2 - 8 ℃
产品特点:
·特殊配方提高包涵体蛋白的溶解性。
·直接使用,方便,快捷。
·本试剂中的变性剂可通过透析去除。
注意事项:
1. 本试剂含有变性剂,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
2. 在低于4℃的保存温度下易出现絮状沉淀,使用时恢复至室温,絮状沉淀溶解后即可进行后续步骤。