产品描述
产品及特点:AT克隆就是利用T载体两个3’端各带有一个T突出,而PCR扩增产物两个3’端各带有一个A突出的特点,在DNA连接酶的作用下,将PCR产物克隆到T载体中的过程,它是克隆PCR扩增产物的主要手段。本产品提供了完成AT克隆的所有成份,具有下列特点:
1. 一站式,用户只需要准备PCR产物即可进行AT克隆。
2. T载体由Xcm I酶切方法制备,两个5’端含T突出,自连率几乎为零。
3. 克隆效率高,一次AT克隆实验一般能得到上百个重组子。
4. 阳性率高,一般能到90%以上, 大大缩短了筛选工作。
5. 提供供两次实验用的对照插入片段,方便分析实验数据。
6. 插入位点两侧有对称的常见酶切位点(如EcoR I),便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
7. 克隆位点两侧分别有T3和T7 RNA聚合酶启动子, 便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
8. 可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
9. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α-肽编码区内,可以进行蓝白斑筛选。
10. 含有丝状噬菌体f1 复制起始子,可以制备单链DNA。
规格及成分:
成份 20次塑料袋包装
即用型蓝白T载体(50 ng/uL) 20 uL
对照插入片段(50 ng/uL) 5 uL
T4 快速连接缓冲液,2× 100 uL
T4 DNA 连接酶(5 U/uL) 30 uL
超纯水 1 mL
高效感受态细胞 100 uL×10只(只B型有)
使用手册 1份
运输及保存:低温运输,-20℃保存,有效期一年。感受态细胞需要干冰运输,-70℃保存,有效期6个月。
自备试剂:插入片段