pCMV-N-Flag是晶安生物自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N端和Flag tag(Flag标签)融合的目的
蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5'端含有一个可以编码Flag标签的序列,因此可以表达出含有Flag标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Flag的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-N-Flag质粒的主要信息如下:
FeatureNucleotide Position
CMVpromoter 1–602
T3promoterandT3primerbindingsite 620–639
Flagtag 679–702
multiplecloningsite 705–778
T7promoterandT7primerbindingsite 821–842
SV40polyAsignal 854–1237
f1originofss-DNAreplication 1375–1681
blapromoter 1706–1830
SV40promoter 1850–2188
neomycin/kanamycinresistanceORF 2223–3014
HSV-thymidinekinase(TK)polyAsignal 3015–3473
pUCorigin 3602–4269
pCMV-N-Flag质粒的图谱如下:
![](http://www.beyotime.com/d2722_clip_image002.jpg)