产品基本信息

产品简介

Serum-Free细胞冻存液是埃泽思生物（AppliedCell™）自主开发的一款无血清、无需程序降温的细胞冻存液，适用于多种哺乳动物细胞和间充质干细胞的冻存。该款冻存液内毒素水平远低于药典规定标准，适用于生产型细胞冻存；同时该款冻存液所有成分均为原料药级别，GMP级别生产车间，严格执行cGMP操作标准，各项指标优于行业标准。

如需冻存胚胎干细胞/诱导多能干细胞（ES/iPS）参考使用Serum-Free干细胞高效冻存液（AC-1001011/AC-1001012）。

产品特性

l 安全(Safe)：无外源动物成分，大大降低各类病毒、霉菌和支原体等的污染；热源水平低于药典标准1/10，减少外源内毒素干扰。

l 高效(Efficient)：无血清成分，所有成分均为原料药级别，极大降低批次间差异，避免实验条件的重复摸索；冻存细胞复苏率高达90%，细胞状态不同，复苏率会有差异。

l 简单(Simple)：即用型产品，使用本产品冻存的细胞无需程序降温可直接冻存于-80℃冰箱或液氮中长期保存。

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操作方法

选择对数生长期的细胞冻存，有助于提高细胞复苏存活率。

1）按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于离心管中。

2）按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×10⁵ 至5×10⁶ cells/ml）。

3）1200rpm-1500rpm，5min，弃上清液。

4）加入适量的APPLIEDCELL®细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×10⁵ -5×10⁶ cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞悬液。

5）将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。

6）直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱，24h后转入移至-196℃液氮罐长期冷冻保存。

细胞复苏操作方法

1、从液氮罐取出冻存细胞，立即放入37℃立即放入水浴锅或其他细胞复苏设备中，快速融化。

2、准备离心管，加入2倍细胞悬液体积的细胞培养基，待冻存管中细胞完全融化后，将冻存细胞悬液缓慢加入离心管中。

3、1200-1500rpm离心5min，弃上清。

4、加入适量新鲜培养基，使用移液管缓慢悬浮细胞，并将细胞转染细胞培养皿/瓶中，显微镜下观察细胞状态，放入细胞培养箱中培养。

5、24h后观察细胞状态，并更换新鲜细胞培养液。