产品简介

DAPI，即4’,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐，4’,6-Diamidino-2-phenylindole,dihydrochloride，也称DAPIdihydrochloride，分子式为C16H15N5·2HCl，分子量为350.25，CAS号28718-90-3。

DAPI是一种常用的可以穿透细胞膜的蓝色荧光核酸染料，和双链DNA结合后可以产生比自身强20多倍的荧光。和EB（ethidiumbromide）相比，DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。DAPI的更大激发波长为340nm，更大发射波长为488nm；DAPI和双链DNA结合后，更大激发波长为358nm，更大发射波长为461nm。DAPI也可对RNA进行染色，染色机理是其可以选择性嵌入“AU序列”并发出荧光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358nm/461nm)，DAPI-RNA具有较长的更大发射波长（500nm），其荧光亮度仅有DAPI-dsDNA的20%。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但可以通过提高浓度使之进入活细胞。

DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，MicroplasmDNA以及染色体DNA。DAPI典型的蓝色荧光特性使其非常普遍的搭配其他绿色、黄色或红色荧光染料用于细胞生物学多色荧光标记技术，因此也常作为核酸和染色体的复染剂用于细胞凋亡检测、RNA原位杂交、直接或间接免疫检测等领域，其染色后可用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

本产品为溶液，分为2种形式，浓度为5mg/mL和即用型，即用型产品可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。5mg/mLDAPI需稀释后使用。用于细胞核染色时，推荐的DAPI工作浓度为0.5-10µg/mL。

保存条件

冰袋运输，-20ºC避光保存，至少1年有效。

注意事项

1．DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

2．荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

3．为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4．低浓度的DAPI不容易穿透细胞膜。

5．本产品仅用于科学研究，不得用于临床诊断和治疗，不得用于食品和药品，不得存放于普通住宅内。

6．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI染色。

1．配制工作液：用双蒸水或PBS稀释母液，配制成所需要的工作的浓度（0.5-10μg/mL）。

2．对于贴壁细胞或组织切片：加入适量DAPI染色液，覆盖住样品即可。

对于悬浮细胞：至少加入样本体积3倍的染色液，混匀。

3．室温放置3-5min。

4．吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5min。

5．直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm，发射波长460nm。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。